對于Lonza支原體檢測試劑盒的操作使用，小編發(fā)現(xiàn)許多人都還不是很了解該如何正確的操作，今天呢小編就給大家講一下Lonza支原體檢測試劑盒的詳細操作步驟吧

Lonza支原體檢測試劑盒操作步驟： 

貼壁細胞：1.被檢細胞接種于無菌的6孔細胞培養(yǎng)板中，接種密度為1-2×104。同時，接種正常無支原體感染的同種細胞，作為陰性對照。2.5天后，先吸去培養(yǎng)液，再加入1ml的固定液，靜置20min，3.吸去固定液，晾干。4.于每孔中，加入1ml的Hoechst33258工作液（Hoechst 33258工作液須覆蓋全部被檢細胞），37℃避光放置15-20min或室溫靜置20～30min。5.吸去Hoechst 33258工作液，加入2ml滅菌超純水洗滌三次，直接風(fēng)干。風(fēng)干后加入一滴封片液，并以蓋玻片覆蓋。6.熒光顯微鏡觀察。用紫外激發(fā)光激發(fā)，觀察細胞周圍是否有藍色熒光小點或串珠狀熒光小點。

懸浮細胞：1.收集需檢測的細胞，1500rpm，5min。2.將收集的細胞涂片于載玻片上，再加1ml的固定液，靜置20min。3.吸去固定液，晾干。4.于每孔中，加入1ml的Hoechst33258工作液（Hoechst 33258工作液須覆蓋全部被檢細胞），37℃避光放置15～20min或室溫靜置20～30min。5.吸去Hoechst 33258工作液，用無菌水洗滌玻片3次，直接風(fēng)干。風(fēng)干后加入一滴封固液，并以蓋玻片覆蓋。6.熒光顯微鏡觀察。用紫外激發(fā)光激發(fā)，觀察細胞周圍是否有藍色熒光小點或串珠狀熒光小點。結(jié)果判斷（參考）：陰性：僅見細胞的細胞核呈現(xiàn)黃綠色熒光。陽性：除細胞外，細胞周圍可見大量的大小均一的熒光著色顆粒。

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